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內含福利 || 那些年，血清為實驗猿背的“鍋”.......
更新時間：2019-10-30 瀏覽次數：2558
細胞培養(yǎng)可以說是整個生物技術產業(yè)的發(fā)展的核心，培養(yǎng)基的質量則是影響細胞培養(yǎng)的關鍵因素。在培養(yǎng)基的各種成分中，血清是細胞培養(yǎng)過程中外源添加的成分不確定的物質，血清的質量直接影響到細胞培養(yǎng)的效果，甚至對整個實驗的成敗起著關鍵性的作用。
所以，選用血清能夠使我們的實驗少走彎路，“*上”。然而，Gibco曾就血清質量做過一次調查，結果表明：使用者對血清不正確的儲存與使用方式常常導致了血清質量下降，實驗效果不理想。
那么問題來了：血清在儲存與使用過程中有哪些注意事項？如何才能保證采購的血清在儲存過程中不產生質量損失呢？
下面我整理了一些Q&A供大家參考：
Q：保存血清推薦的方法?
A：我們建議血清應保存在-5 ℃至-20 ℃。然而，若存放于4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。
Q：如何解凍血清才不會使產品質量受損?
A：我們建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8 ℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。
Q：血清解凍后發(fā)現有絮狀沉淀物出現，該如何處理?
A：血清中沉淀物的出現有許多種原因，但比較普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白 (形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質量。若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內，以400 g 稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞您的過濾膜。
Q：為什么要熱滅活血清?
A：加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究，培養(yǎng)ES 細胞，昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。
Q：有必要做熱滅活嗎?
A：實驗顯示，經過正確處理的熱滅活血清，對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是 “小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此我們建議您，若非必須，您可以不需要做熱處理這一步。如此一來，不但節(jié)省您寶貴的時間，更確保血清的質量!
Q：為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現沉淀?
A：胎牛血清儲存在2-8 ℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的質量。推薦在-20 ℃儲存胎牛血清，避免反復凍融。
Q：如何避免沉淀物的產生?
A：我們建議您在使用血清的時候，注意下列的操作：解凍血清時請按照所建議的逐步解凍法 (-20 ℃至4 ℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20 ℃至37 ℃)，實驗顯示非常容易產生沉淀物。解凍血清時請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。
關于血清的儲存與使用，若您還有其他疑問，歡迎在評論區(qū)留言~
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